液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出,通過(guò)檢測器時(shí),樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來(lái)。
1、分離樣品成分:主要功能是分離樣品中的化合物或成分。柱內填充物(也稱(chēng)為固定相)的選擇和性質(zhì)決定了分離的效果。不同的柱填充物可以根據化合物的特性(如極性、分子量、結構等)進(jìn)行選擇,以實(shí)現分離和純化目標化合物的目的。
2、保持分離效果:設計和構造有助于保持分離效果的穩定性和重現性。柱內填充物的特性和柱的物理參數(如長(cháng)度、內徑、顆粒大小等)對分離的選擇性和效率起著(zhù)重要作用。柱的穩定性和重現性對于長(cháng)時(shí)間運行和重復測量非常重要。
3、與檢測器連接:作為分離部分與檢測器連接,將分離的化合物引導到檢測器中進(jìn)行信號檢測。柱的連接方式和接口設計對于有效地將分離的組分傳遞到檢測器中起著(zhù)關(guān)鍵作用。常見(jiàn)的接口包括傳統的柱接口和現代的融合柱接口。
4、適應不同應用:可以根據不同的應用需求進(jìn)行選擇和優(yōu)化。柱的選擇取決于分析的目標、樣品的特性和分離的要求。例如,反相柱適用于極性化合物的分離,離子交換柱適用于離子化合物的分離,手性柱適用于手性化合物的分離等。
5、耐久性和壽命:需要具備良好的耐久性和壽命,以確保長(cháng)時(shí)間的穩定分離效果。柱的材料和填充物的質(zhì)量決定了柱的壽命和使用壽命。適當的使用和維護可以延長(cháng)柱的壽命,并提高分離效果的穩定性。